菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種、原種(二級種)和栽培種(三級種)三級。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純**菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的**菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在**上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些**菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
產(chǎn)品名稱:單核增生李斯特菌
產(chǎn)品貨號:BJ-J13462
拉丁文: Listeria monocytogenes
分離基物: 人類
提供形式: 凍干粉
**等級: 2
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究;分析檢測。研究、質(zhì)量控制。質(zhì)量控制菌種,《GB 4789.28 培養(yǎng)基和試劑的質(zhì)量要求》標(biāo)準(zhǔn)菌株。
培養(yǎng)基: 腦心瓊脂:心提取物 5.0g,腦提取物 12.5g,月示 胨10.0g,葡萄糖 2.0g,NaCl 5.0g,Na2HPO4 2.5g,瓊脂15.0g,蒸餾水1.0L,pH7.4。
生長條件: 37.0°C,好氧。
生長特性: G+短棒狀小桿菌,有動力,過氧化氫酶陽性,血平板上產(chǎn)生β-溶血;硝酸鹽還原實驗陰性,尿素酶試驗陰性,不發(fā)酵木糖、甘露醇;甲基紅反應(yīng)陽性,伏-普實驗陽性,發(fā)酵葡萄糖、麥芽糖、七葉苷、鼠李糖;三糖鐵試驗產(chǎn)酸、不產(chǎn)硫化氫;兼性厭氧,適pH7.4~7.6。
存儲條件: 2-8℃。
微生物培養(yǎng)方法:產(chǎn)品僅用于科研
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養(yǎng),有時母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級發(fā)酵。同樣道理,使用三級種子的發(fā)酵,稱為四級發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,單核增生李斯特菌質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。
RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISA試劑盒大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 仙茅木酚素 HPLC≥95% 20mg
小鼠微粒體谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶1(MGST1)ELISA試劑盒 ,英文名: MGST1 ELISA Kit 馬尾柴酸 HPLC≥98% 20mg
兔合成酶(NOS)ELISA檢測試劑盒Rabbitniicoxidesyhase,NOSELISAKit
96T/48T 喇叭茶醇 HPLC≥98% 20mg
牛羧化不全骨鈣素(ucOC)試劑盒 Bovine
undercarboxylated osteocalcin,ucOC ELISA kit 愈創(chuàng)木素 HPLC≥98% 20mg
英文名稱HumanGlialCell-linederivedNeuroophicFactorELISAKit人膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)規(guī)格:96T/48T 黃獨(dú)素D HPLC≥95% 20mg
調(diào)料比色法定量檢測試劑盒20 重樓皂苷VII HPLC≥95% 20mg
RatPhosphotylinosital3kinase,PI3KELISA試劑盒大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 竹葉椒堿 HPLC≥95% 20mg
小鼠微粒體甘油三酸酯轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(MTTP)ELISA試劑盒 ,英文名: MTTP ELISA Kit 槐定堿 HPLC≥98% 20mg
兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA檢測試劑盒Rabbitansforminggrowthfactorβ2,TGFβ2ELISAKit 96T/48T 齒孔醇 HPLC≥95% 20mg
牛雙氫(DHT)試劑盒 Bovine Dihydrotestosterone,DHT ELISA Kit 桑辛素 C HPLC≥95% 20mg
磷酸肌酸激酶(兔?。患∷崃姿峒っ福ㄍ眉。?span lang="EN-US">
CPK
其他Creatine phosphokinase(rabbit muscle) ;Creatine Kinase;Phosphocreatine phosphokinase
產(chǎn)品規(guī)格:BR,150u/mg,Type I
包裝:1KU/17.5KU
CAS號:9001-15-4
級別:BR
分子量:~81000
類型:Type I
Protein by biuret:Approx. 95%
活力:≥150 units/mg protein
分子量:102000~110000
活力:≥30units/mg
活力定義: 1 unit reduces 1umole of DCPIP per minute
at25℃ ,pH8.5(在25℃ ,pH8.5,1分鐘還原1μmol 2,6-二靛酚的酶量為1單位)
性狀:淺棕黃色凍干結(jié)晶或呈現(xiàn)熒光的黃綠色粉末,適pH值8.5。N-乙基順丁烯二對其有抑制作用
用途:生化研究
(糖原II) Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人維生素B6(VB6)ELISA試劑盒