菌種的培養(yǎng):
1、菌種是指食用菌菌絲體及其生長基質(zhì)組成的繁殖材料。菌種分為母種、原種(二級(jí)種)和栽培種(三級(jí)種)三級(jí)。工業(yè)發(fā)酵的有用菌種,其篩選步驟包括菌種分離、初篩和復(fù)篩。
2、挑選具有某種能力的有用菌種,也稱種子制備,是指菌種在一定條件下,經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)成為具有一定數(shù)量和質(zhì)量的純**菌種的制備過程。以作接入發(fā)酵罐中進(jìn)一步擴(kuò)大菌體量及合成產(chǎn)物之用。
3、種子制備包括孢子制備和菌絲體制備 菌種制備。
4、保存在沙土管或冷凍管中的**菌種,用無菌手續(xù)挑取少許,接入瓊脂斜面培養(yǎng)基上,在25℃(或較高溫度)下培養(yǎng)5~7天(或較長時(shí)間。所得孢子還需進(jìn)一步用較大表面積的固體培養(yǎng)基以獲得更多孢子(對(duì)于霉菌類孢子制備,多數(shù)采用大米、小米之類的天然培養(yǎng)基)。
5、將培養(yǎng)成熟的斜面孢子制成懸浮液,接種到扁瓶固體培養(yǎng)基上,于25~28℃培養(yǎng)14天。將成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中備用。一次制得的孢子瓶可在**上延續(xù)使用半年左右。
6、如果有些**菌種不產(chǎn)孢子,如赤霉素產(chǎn)生菌或產(chǎn)孢子不多的,則可采用搖瓶液體培養(yǎng)制得菌絲體,作種子罐的種子。種子罐的目的是使接入有限的孢子或菌絲體迅速發(fā)芽、生長、繁殖成大量菌體。其中的培養(yǎng)基組分應(yīng)是易于被菌體利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米漿),及無機(jī)鹽(如磷酸鹽)等。作為發(fā)酵罐的種子應(yīng)生命力旺盛、染色深、菌絲粗壯,無雜菌及異常菌體。接種量一般在10%~20%。
產(chǎn)品名稱:淡紫色擬青霉
產(chǎn)品貨號(hào):BJ-J13456
拉丁文: Paecilomyces lilacinus
提供形式: 凍干粉
**等級(jí): 1
模式菌株: no
培養(yǎng)基: 綜合馬鈴薯培養(yǎng)基:20%馬鈴薯汁)1L ,葡萄糖20g, KH2PO4 3g ,MgSO4.7H2O 1.5g, Vitanib B1 (硫胺素) 微量,瓊脂)15g, pH 6
生長條件: 25-28℃,好氧
微生物培養(yǎng)方法:產(chǎn)品僅用于科研
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細(xì)胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨(dú)立分布的單個(gè)細(xì)胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進(jìn)行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個(gè)細(xì)胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落。
上述兩種方法雖然都可以實(shí)現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對(duì)菌落計(jì)數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對(duì)平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動(dòng)培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴(kuò)展,使之分布均勻。
微生物菌種的培養(yǎng):
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養(yǎng)基,培養(yǎng)基中含有一些適合產(chǎn)孢子的營養(yǎng)成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機(jī)鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成生理酸性的營養(yǎng)環(huán)境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養(yǎng)可直接或間接誘導(dǎo)孢子形成。放線菌斜面的培養(yǎng)溫度大多數(shù)為28 ℃,少數(shù)為37 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養(yǎng),一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農(nóng)產(chǎn)品為培養(yǎng)基。這是由于這些農(nóng)產(chǎn)品中的營養(yǎng)成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養(yǎng)基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養(yǎng)一般為25~28 ℃,培養(yǎng)時(shí)間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進(jìn)罐,常采用母瓶、子瓶兩級(jí)培養(yǎng),有時(shí)母瓶種子也可以直接進(jìn)罐。種子培養(yǎng)基要求比較豐富和完全,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養(yǎng)成分不宜過濃,子瓶培養(yǎng)基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養(yǎng)基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為種子、二級(jí)種子和三級(jí)種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經(jīng)培養(yǎng)后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為種子,把種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為二級(jí)發(fā)酵。如果將種子接入體積較大的種子罐內(nèi),經(jīng)過培養(yǎng)形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級(jí)種子,將二級(jí)種子轉(zhuǎn)入發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵,稱為三級(jí)發(fā)酵。同樣道理,使用三級(jí)種子的發(fā)酵,稱為四級(jí)發(fā)酵。
公司專業(yè)代理ATCC菌種,淡紫色擬青霉質(zhì)量保證,為大中型科研提供嚴(yán)格質(zhì)量體系控制的ATCC,CMCC,CICC,DSMZ標(biāo)準(zhǔn)菌株。
Mouseglialfibrillaryacidicprotein,GFAPELISAKit小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
,十七碳二烯,二炔,二醇 HPLC≥95% 20mg
小鼠維生素D2(VD2)ELISA試劑盒 ,英文名: VD2 ELISA Kit δ,羥基補(bǔ)骨脂酚 HPLC≥95% 20mg
小鼠嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白Eotaxin1(Eotaxin1/CCL11)ELISA檢測試劑盒MouseEotaxin1ELISAKit 96T/48T ,'O二甲基鞣花酸 HPLC≥95% 20mg
人過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒 Human PPAR-α ElISA Kit
,'O二甲基鞣花酸 HPLC≥95% 20mg
RatEndothelialniicoxidesyhase3,eNOS-3ELISAKit大鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 異櫻花苷 HPLC≥98% 20mg
5%蛋白電泳聚集預(yù)制膠溶液500毫升 去甲血根堿 HPLC≥96% 20mg
Mouseesogen,EELISA試劑盒小鼠雌(E)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T 金粟堿 HPLC≥95% 20mg
小鼠維生素D(VD)ELISA試劑盒 ,英文名: VD ELISA Kit 人參皂苷Rs HPLC≥95% 20mg
小鼠紅細(xì)胞**素(EPO)ELISA檢測試劑盒MouseErythropoietin,EPOELISAKit
96T/48T 狼毒色酮 HPLC≥95% 20mg
人過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)試劑盒 Human PPARGC1 ELISA Kit Gama生育三烯酚 HPLC≥95% 20mg
Ribonulease H
產(chǎn)品規(guī)格:BR,2-5 u/ul
包裝:500U/100u
CAS號(hào):9050-76-4
級(jí)別:BR
分子量:18.4kDa,單體
來源:大腸桿菌MRE-600細(xì)胞
濃度:2~5u/ul
活力定義:1個(gè)活性單位是指在37℃、20分鐘內(nèi)催化產(chǎn)生1nmol酸性可溶產(chǎn)物所需的酶量
酶活性分析混合物:20mM Tris-HCL(PH7.8), 40mM KC1, 8mM MgCL2,
1mM DTT, 24uM[3H]-poly(A)poly(dT), 0.03mg/ml BSA, 4%(v/v)甘油
保存緩沖液組成:25mM HEPES-KOH(PH8.0), 50mM KC1, 0.1mM
EDTA, 1mM DTT, 0.1mg/ml BSA, 50%(v/v)甘油
10×反應(yīng)緩沖液:20mM Tris-HCL(PH7.8), 400mM KC1, 80mM MgCL2, 10mM DTT
保存緩沖液組分:50mM Tris-HCL(PH7.4)和50%(v/v)甘油
質(zhì)量控制:相關(guān)測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、蛋白酶污染,功能檢測方法為質(zhì)粒DNA化過程中的RNA降解(與RNase A協(xié)同作用)
抑制劑:金屬離子Mg2+、Ca2+、Zn2+、Fe2+、Cu2+(MgCL2,
100mM濃度時(shí)抑制效率約40%;CaCL2,10mM濃度時(shí)抑制效率約30%;Zn2+、Fe2+和Cu2+在1mM時(shí)抑制效果很強(qiáng))、單核苷酸(2-GMP,3-GMP等)、guanilyl-2-5-鳥苷
失活:熱失活是可逆的,建議采用過柱化或苯酚/抽提除去該酶
性狀:核糖核酸酶 T1是一種內(nèi)切酶,在G殘基位點(diǎn)特異性降解單鏈RNA。該酶通過形成核苷2′,3′-環(huán)磷酸中間體來切割3′-鳥苷殘基與鄰近核苷5′-OH基團(tuán)之間的磷酸二酯鍵。反應(yīng)產(chǎn)物是3′-GMP末端寡核苷酸。RNase
T1發(fā)揮活性無需金屬離子參與
用途:生化研究
Span40司班401公斤BR 人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白(PCX)ELISA檢測試劑盒HumanPodocalyxin,PCXELISAKit 96T/48T