實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：
1．產(chǎn)品名稱本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 
2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃制造，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 
3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 
4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 
5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

服務(wù)描述：

公司提供委托細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)，細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

發(fā)貨：

客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。公司科技提供的細(xì)胞有標(biāo)準(zhǔn)的鑒定流程，保證細(xì)胞的純度在90%以上，且不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和等。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基；2、說明書及注意事項(xiàng)；3、公司科技售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。

保存和應(yīng)用：

客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞，如是新鮮原代細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h，再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞，客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研。

運(yùn)輸和保存：
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近，公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中，置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作，凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸；收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài)，如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作，如懸浮的細(xì)胞較多，請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
培養(yǎng)操作步驟 ：
1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 
2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 
3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 
4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 
5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 

細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)：
1.研究的對(duì)象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中，根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力，并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測(cè)甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況，包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件，可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制，同時(shí)，可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察，這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后，所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞，需要時(shí)，可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測(cè)和記錄
采用各種研究技術(shù)：如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣，如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等； 
適用的對(duì)象范圍廣，從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物，一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織，都可進(jìn)行有針對(duì)性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對(duì)較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對(duì)象。
直接細(xì)胞克隆兩步法逆轉(zhuǎn)錄PCR試劑盒100 三丁酯(標(biāo)準(zhǔn)品)  Tributyl phosphate  質(zhì)量規(guī)格：分析標(biāo)準(zhǔn)品

Mousealpha-fetoproteinLensculinarisaggliin3,AFP-L3ELISAKit小鼠小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體3(AFP-L3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 皂土(膨潤土)(Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑)  Bentonite  質(zhì)量規(guī)格：Bentone SD-1,適于中至低極性溶劑

小鼠0酸化酪酸蛋白激酶JAK3(pJAK3)ELISA試劑盒 ，英文名： pJAK3 ELISA Kit 皂土(膨潤土)(Bentone SD-2,適于中高極性溶劑)  Bentonite  質(zhì)量規(guī)格：Bentone SD-2,適于中高極性溶劑

大鼠皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)ELISA檢測(cè)試劑盒ratCoicosterone,COELISAKit 96T/48T 活性炭粉(AR,200目,粉末狀,褐色)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：AR,200目,粉末狀,褐色

人電壓門控通道抗體(VGKC-ab)試劑盒 Human voltage-gated potassium channel aibody,VGKC-ab ELISA Kit 活性炭(CP,200目,粉末狀,褐色)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：CP,200目,粉末狀,褐色

RatNeuroophin3,-3ELISAKit大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(-3)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 活性炭顆粒(AR,20-50目)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：AR,20-50目

EGFP標(biāo)記二抗(抗人;抗兔;抗小鼠;抗大鼠)100微升 活性炭(電鍍脫色,200目,from wood)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：電鍍脫色,200目,from wood

MousePyruvateKinase,M2-PKELISA試劑盒小鼠同酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T 活性炭(催化劑載體,8-16目)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：催化劑載體,8-16目

小鼠0酸化基末端蛋白激酶(P-JNK)ELISA試劑盒 ，英文名： P-JNK ELISA Kit 活性炭(凈水、氣體化,棒,φ1.0mm)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：凈水、氣體化,棒,φ1.0mm

大鼠游離β絨毛膜促性腺(f-βCG)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratfreechorionicgonadoopin,f-βCGELISAKIT 96T/48T 活性炭(凈水、氣體化,10-24目)  Activated charcoal  質(zhì)量規(guī)格：凈水、氣體化,10-24目
1961/12/1  Dibucaine (Cinchocaine) HCl  10mg  Canine respiratory coronavirus, CRCoV(CRCoV)犬呼吸道病毒RT-LAMP試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）  50次  低溫  負(fù)20度

1961/12/1  Dibucaine (Cinchocaine) HCl  10mM(in1mLDMSO)  Canine Leishmaniosis(Canl)犬利什曼原蟲染料法熒光定量PCR試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）  50次  低溫  負(fù)20度

1961/12/1  Dibucaine hydrochloride  10g  Canine Leishmaniosis(Canl)犬利什曼原蟲PCR試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）  50次  低溫  負(fù)20度

1961/12/1  Dibucaine hydrochloride  5g  Canine Leishmaniosis(Canl)犬利什曼原蟲探針法熒光定量PCR試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）  50次  低溫  負(fù)20度

1963/12/7  Benzquinamide (P2647)  10mg  Diffusely Adherent E.coli(DAEC)彌散黏附性大腸桿菌（大腸埃希菌）探針法熒光定量PCR試劑盒  動(dòng)物病原微生物檢測(cè)（科研用）  50次  低溫  負(fù)20度
LX2：肝星形細(xì)胞培養(yǎng) 規(guī)格T25m2

MCF-7：RKO細(xì)胞乳腺癌細(xì)胞保存 規(guī)格T25m2

MDA-MB-231乳腺癌細(xì)胞系實(shí)驗(yàn) 規(guī)格T25m2

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