實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
1.產(chǎn)品名稱本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法;
2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理;
3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕;
4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率;
5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。
產(chǎn)品名稱 |
規(guī)格 |
貨號(hào) |
HGF-1:牙齦成纖維細(xì)胞培養(yǎng) |
T25m2 |
BJ-X63274 |
描述:(1)公司可提供新鮮或凍存細(xì)胞株;(2)細(xì)胞株數(shù)量約 5×105/瓶;(3)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、酵母。
發(fā)貨:客戶可根據(jù)自身科研項(xiàng)目的需要選擇不同類型的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和相應(yīng)的細(xì)胞密度。發(fā)貨的新鮮細(xì)胞還包含:1、發(fā)貨的T25方瓶中裝滿50ml左右完全培養(yǎng)基;2、說明書及注意事項(xiàng);3、售后服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)。
保存和應(yīng)用:客戶可以根據(jù)自己的需求選擇新鮮或者凍存的原代細(xì)胞,如是新鮮細(xì)胞株,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置后2-3h,再進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)操作。如是凍存細(xì)胞,客戶收到細(xì)胞后應(yīng)立即將其放入液氮、-80℃冰箱或立即進(jìn)行復(fù)蘇。該細(xì)胞只可用于科研。
運(yùn)輸和保存:
視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。
1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。
2)T-25培養(yǎng)瓶充滿完全培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1)準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)21875-091),90%;胎牛血清,10%。
2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲(chǔ)存。
培養(yǎng)操作步驟 :
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。
細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
1.研究的對象是活細(xì)胞
在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評(píng)估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動(dòng)等。
2.研究條件可以人為控制
pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備 記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
5.研究的范圍比較廣泛
應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等;
適用的對象范圍廣,從低等動(dòng)物到高等動(dòng)物,一種動(dòng)物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)
可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。
異煙酸 Isonicotinic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 地生蘭(terresial)移植維護(hù)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
L-蘋果酸 L-Malic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 地生蘭(terresial)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
蛋白酶K溶液(20 mg/ml) Proteinase K Solution, 20 mg/ml 質(zhì)量規(guī)格:20 mg/ml 電擊法酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒20
多聚賴氨酸0.1%溶液 Poly-L-lysine solution ( 0.1%) 質(zhì)量規(guī)格:M.W:150,000~300,000 電擊法細(xì)胞融合試劑盒10
鹽酸四環(huán)素溶液,50 mg/ml Tetracycline solution, 50 mg/ml, sterile 質(zhì)量規(guī)格:50 mg/ml,裝 電鏡檢測化學(xué)固著溶液10毫升
D-葡糖糖-6-二鈉二水 D-Glucose-6-phosphate, di, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR 電鏡樣品固著液(2%Formalin固著液)50毫升
丁二酸鈉(AR) succinate 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99% 電鏡組織三固著液(2,4,6-imethylpyridinepuriss)50毫升
牛血紅蛋白 Hemoglobin 質(zhì)量規(guī)格:BR 電轉(zhuǎn)感受態(tài)制備試劑盒1
聚乙二醇10000 PEG 10000 質(zhì)量規(guī)格:分子量9,000~11,000 電轉(zhuǎn)印DNA南方雜交試劑盒5
DL-蘋果酸 DL-Malic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR 吊鐘海棠完全培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
地生蘭(terresial)播種培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 硫酸軟骨素 Chondroitin sulfate 質(zhì)量規(guī)格:>95%,BR
地生蘭(terresial)移植維護(hù)培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 異煙酸 Isonicotinic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
地生蘭(terresial)增殖培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑 L-蘋果酸 L-Malic acid 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BR
電擊法酵母細(xì)胞轉(zhuǎn)化試劑盒20 蛋白酶K溶液(20 mg/ml) Proteinase K Solution, 20 mg/ml 質(zhì)量規(guī)格:20 mg/ml
電擊法細(xì)胞融合試劑盒10 多聚賴氨酸0.1%溶液 Poly-L-lysine solution ( 0.1%) 質(zhì)量規(guī)格:M.W:150,000~300,000
電鏡檢測化學(xué)固著溶液10毫升 鹽酸四環(huán)素溶液,50 mg/ml Tetracycline solution, 50 mg/ml, sterile 質(zhì)量規(guī)格:50 mg/ml,裝
電鏡樣品固著液(2%Formalin固著液)50毫升 D-葡糖糖-6-二鈉二水 D-Glucose-6-phosphate, di, dihydrate 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BR
電鏡組織三固著液(2,4,6-imethylpyridinepuriss)50毫升 丁二酸鈉(AR) succinate 質(zhì)量規(guī)格:AR,>99%
電轉(zhuǎn)感受態(tài)制備試劑盒1 牛血紅蛋白 Hemoglobin 質(zhì)量規(guī)格:BR
電轉(zhuǎn)印DNA南方雜交試劑盒5 聚乙二醇10000 PEG 10000 質(zhì)量規(guī)格:分子量9,000~11,000
大鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞提取物【Rat Lung: Normal
Vein Smooth Muscle Cell Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 5μg/ 200μg
HGF-1:牙齦成纖維細(xì)胞培養(yǎng)大鼠肺泡上皮細(xì)胞提取物 【Rat Lung: Normal Alveolar Epithelial Cell Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 5μg/ 200μg
大鼠關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞提取物 【Rat Bone: Normal Articular Chondrocyte Derivatives】 規(guī)格50rxn/ 5μg/ 200μg
我司常期代理ATCC Acris abcam cst Biorbyt santa Novus sigma lifespan NEB roche ABI R&D millipore BD Qiagen Cayman Jackson Life GeneTex Bio-Rad DSHB tocris peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價(jià),產(chǎn)品貨期短,價(jià)格優(yōu),售后齊全。